今天是:
您的位置:首页 >> 羊眼圈

高效毛细管电泳法测定注射用头孢他啶的含量0定向天线

时间:2022-09-07 21:59:43 来源:胶板机械网 浏览量:0

高效毛细管电泳法测定注射用头孢他啶的含量

高效毛细管电泳法测定注射用头孢他啶的含量 2011年12月04日 来源: [摘要]目的用HPCE测定注射用头孢他啶的含量。方法高效毛细管电泳法,有效毛细管长度60cm×内径75μm;硼砂缓冲液25mmol/L (pH8.2),高压进样5s,分离电压20KV,温度为25℃,检测波长为254nm,头孢曲松为内标。结果头孢他啶在4~20μg/ml 浓度范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为98.96%(n=5,RSD =1.74%)。结论本法简单、快捷、灵敏。[关键词]头孢他啶;高效毛细管电泳法 头孢他啶属第三代头孢类抗生素,具有抗菌谱广、抗菌作用强的特点。对多种β-内酰胺酶有抵抗力,临床广泛应用于各种单纯及混合感染。目前测定头孢他啶含量较成熟的方法有HPLC法。高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展迅速的一种新的分离分析技术。与传统的分离分析手段相比较,具有高效、快速、微量和易于自动化等优势。HPCE分析抗生素的研究正引起人们的关注。高效毛细管电泳测定头孢他啶的含量国内未见报道。本文建立了用HPCE法测定头孢他啶含量的方法,此方法采用内标法测定简便灵敏、结果可靠,重现性好,能满足头孢他啶的药品质量监控。1 仪器与试药 高效毛细管电泳仪,石英毛细管柱(60cm×75/μm)(均为美国Waters公司产品);Milennimn32数据处理系统;头孢他啶标准品(中国药品生物制品检定所);头孢曲松标准品(中国药品生物制品检定所);注射用头孢他啶(广州白云山制药股份有限公司,批号030407、030414、030509、030520、030605);硼砂、氢氧化钠均为分析纯。2 方法与结果2.1 缓冲液的配制 精密称取4.78g硼砂溶于500ml水中,配成25mmol/L 硼砂电泳缓冲液溶液,磷酸调DH为8.2。2.2 电泳操作条件分离电压:20KV;检测波长:254nm;进样量:50kPa×5s;缓冲液:25mmol/L 硼砂溶液(pH8.2)。每次进样前用缓冲液冲洗毛细管柱10rain,每次分析后用0.1mol/L 的氢氧化钠溶液冲洗2min,水冲洗10min。所用溶液均经0.45μm滤膜滤过。上述电泳条件,得电泳图。2.3 标准品溶液和内标溶液的配制 精密称取头孢他啶标准品10.0mg,置于100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,配成0.1mg/ml 的头孢他啶标准品溶液。精密称取头孢曲松标准品20.0rng置于100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。吸取上述溶液5ml置25ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,配成头孢曲松40μg·/ml 的内标溶液。2.4 线性关系考察 精密吸取头孢他啶标准品溶液2、4、6、8、l0ml置于50ml量瓶中,分别加内标溶液5ml,用水稀释至刻度,摇匀,按上述电泳条件,分别进样5s,以标准品浓度(μg/ml )为横坐标(C),头孢他啶主峰面积与内标峰面积比为纵坐标(A)作图,回归方程为:A=0.248 C 一0.078,r =0.999 7,n =5头孢他啶在4~20μg/ml 浓度范围内线性关系良好。2.5 精密度试验 精密吸取头孢他啶标准品溶液2ml和内标溶液5ml置于50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。按上述电泳条件,重复进样5次,测得头孢他啶峰面积的RSD为1.82% ,表明仪器精密度良好。2.6 稳定性试验 将同一标准品溶液在相同电泳条件下,分别于0、1、2、3、4h重复进样5次,测得头孢他啶峰面积的RSD为1.89% ,表明头孢他啶在4h内测定结果稳定。2.7 重复性试验 按样品测定项下方法,对同一批号样品,分别取样平行测定5次,求得含量的相对标准偏差RSD为2.01% ,表明重复性较好。2.8 加样回收率试验 按照2.4项的方法配制10、20、30μg·ml 三个已知浓度的样品与内标的混合溶液,加入头孢他啶标准品溶液进行测定,以头孢他啶峰面积与内标峰面积比代入回归方程计算回收率。2.9 样品测定 取注射用头孢他啶5批,精密称取适量置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。精密吸取该溶液lml置于25ml量瓶中,加入内标溶液2ml,用超纯水稀释至刻度,摇匀。进样,内标法计算5批样品的含量并与I-IPLC法测定的结果相比较,结果表明两种方法测定的结果之间无显著性差异。3 讨论3.1 由于头孢他啶溶液呈酸性,宜选用碱性缓冲液。本实验在对不同缓冲液进行的实验中,发现硼砂对头孢他啶的分离最理想。研究表明缓冲液浓度和pH值对分离具有重要影响。高浓度缓冲液可获得较好的分离,但保留时间会变长,而且,导致通过毛细管的电流增加,从而增大焦耳热。因此,我们选用25mmol/L 硼砂作缓冲液。pH值选择是决定分离成败的关键。采用pH8.2的硼砂缓冲液时分析时间短,峰形尖锐、对称并达到基线分离。3.2 研究表明,柱温降低分离度变好,但柱效降低,分析时间变长。综合考虑分离度和迁移行为的变化,本实验选用25℃柱温较合适。分离电压是毛细管电泳的一项重要参数,实验表明,增加组分的迁移速度是减少谱带展宽、提高分离效率的重要途径,增加电场强度可以达到提高速度的目的。但高场强度导致通过毛细管的电流增加,从而增大焦耳热。在20KV时,分离选择性最佳。3.3 由于吡啶是头孢他啶合成过程的原敷料,又是降解过程中的降解产物,对人体有一定的毒副作用。因此,在测定中一定要注意低温和避光保存,以防其分解。3.4 本实验对HPLC和HPCE的测定结果进行了比较,两种方法测定的结果无显著性差异。HPLC法与HPCE法相比,具有消耗成本高、分析时间长、有机溶剂用量大等缺点。我们利用高效毛细管电泳法测定头孢他啶的含量,方法简便、准确、快速、重复性好,可为头孢他啶的质量控制提供一种简便的方法。

参考文献:[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[s].北京:化学工业出版社,2000.172[2] 彭军,任耘,孙悦.高效液相色谱法测定头孢他啶注射剂的含量[J].中国医院药学杂志,2001,21(10):600[3] 石瑛,牛彦,吴美红.高效液相色谱测定注射用头孢他啶有关物质[J].广东药学,2001,l1(6):21[4]Flurer C L.Analysis of antibiotics by c印illary electrophoresis[J].Electropho—resis,1997,18(12—13):2427

衡阳市南岳区恒丰宾馆

福州市平潭县东沃茶艺居

彭书平--湖南省益阳市赫山区龙光桥镇道子坪村

河南蓝天电子科技

中润正德(北京)

文昌湖山新罗永砖厂

泉州魅力天使文化传播有限公司

贵州省毕节地区民族传统食品研究所

济南九州玫瑰制品有限公司销售部

深圳嘉道设计有限公司

相关阅读
国内产品线最宽的LCD原料供应商AV功放羊眼圈奔驰配件试压泵雪茄剪Oe

国内产品线最宽的LCD原料供应商随着中国液晶显示产业TN LCD→STN LCD→CSTN感温棒:旋汽车精品入式热电偶 LCD→TFT LCD演进,公司的产品线不断拓宽,从ITO导...[详细]

2023-09-10
最火新能源来了中国抢占产业制高点跨国车企加速AV功放羊眼圈奔驰配件试压泵雪茄剪Xl

新能源来了!中国抢占产业制高点 跨国车企加速布局9月21日《经济参考报》刊发题为《发改委:正制定新能源汽车创新发展战略》的报道。文章称,工信...[详细]

2023-08-25
浙江龙港举办印刷企业电子台账登记培训AV功放羊眼圈奔驰配件试压泵雪茄剪Xv

浙江龙港举办印刷企业电子台账登记培训为提高龙港镇内出版物印刷企业五项制度电子台账登记水平,9月29日下午,县文化市场执法大队龙港中队在富康...[详细]

2023-07-05
磨檫磨损试验机厂家磨粒磨损试验机羊眼圈

本文主要讲解了【磨檫磨损试验机厂家】的相关内容,从不同方面阐述了怎么相处的方法,主要通过步骤的方式来讲解,希望能帮助到大家1、北京中航鼎...[详细]

2023-05-30
缠绕试验机夹具厂家金属缠绕垫缠绕机厂家羊眼圈

本文主要讲解了【缠绕试验机夹具厂家】的相关内容,从不同方面阐述了怎么相处的方法,主要通过步骤的方式来讲解,希望能帮助到大家1、推荐产品C...[详细]

2023-04-20
最火日本TOCOM橡胶期货收跌受原油价格下滑AV功放羊眼圈奔驰配件试压泵雪茄剪x

日本TOCOM橡胶期货收跌 受原油价格下滑拖累11月13日,TOCO其中M橡胶期货收跌,因受隔夜原油价格下滑等拖累。一位泰国的交易商称,“市场只是暂时性修...[详细]

2022-11-22
友情链接